M46 MICROGEN® CAMPYLOBACTER
Bakteriyal enteritis şüphesi olanhastalardan alınan fekal örneklerden seçici besiyerinde izole edilmişenteropathojenik ve thermofilik Campylobacter kolonilerinin identifikasyon doğrulaması için geliştirilmiş latex slideaglütinasyon testidir.
ÇALIŞMA PRENSİBİ
Latex partikülleri,Campylobacter jejuni serotip antijenlerine karşı tepki gösteren tavşan immunoglobilinleri ilekaplanmıştır. Enteropathojenik Campylobacter antijenleri bulunan süspansiyon, latexpartiküller ilekarıştırıldığında aglütinasyon sonucuçökelti oluştuğu gözlenmektedir.
KİT İÇERİĞİ
|
M46a Test Latex Reagent Campylobacter antijenlerine reaksiyon veren tavşan antibodyleri ile kaplı latex partiküllerini içeren reaktif (% 0.099 Sodyum Azide ile korunmuş) ( Mavi Kapak) |
M46 2.5mL |
|
M46b Control Latex Reagent Spesifik olmayan tavşan immunoglobulinleri ile kaplı latex partiküllerini içeren reaktif (% 0.099 Sodyum Azide ile korunmuş) ( Sarı Kapak) |
2.5mL |
|
M46c Positive Control İnaktif Campylobacter antijen prepatı (Test Latex Reagent (M46a) ile reaksiyon gösterirken, Control Latex Reagent (M46b) ile reaksiyon göstermez.) (% 0.099 Sodyum Azide ile korunmuş) (Siyah Kapak) |
1.0mL |
|
M46d Sample Diluent %0.85 izotonik tuz çözeltisi (saline) (% 0.099 Sodyum Azide ile korunmuş) ( Beyaz Kapak) |
50 mL |
|
Kullanım Talimatı |
|
|
Disposable Aglütinasyon Slideları |
|
|
Disposable Karıştırıcı Çubuklar |
|
KİT İÇERİĞİNE İLAVE EDİLECEKLER
·Bakteriyal öze
·Campylobacteryarı-seçici agar
·Plastik disposable numune kapları ( 1mLkapasiteli)
·Mikroaerofilikkültür ortamı için gas jar
·42°C’lik inkübatör (yoksa 37°C’lık kabul edilir)
ÖRNEKHAZIRLAMA
Fekal örnekleri, petri başına 0.2-0.3 gr konsantrasyon olacakşekilde blood-free seçici agara inoküle ediniz. ( Modifiye CCDA Preston)
Petriler mikroaerofilik ortamda 42 °C’de 48 saat inkube ediniz.
Campylobacter morfolojisindeki kolonileri test için seçiniz.
PROSEDÜR
KONTROLPROSEDÜRÜ
Aşağıdaki kontroller reaktiflerin işlevlerinin doğruluğu amaçlıkitin her kullanımında M46c Positive Control (kit içerisindemevcut) ile uygulanmalıdır.
1. (M46c)Positive Control test slide (kitiçerisinde mevcut) üzerinde iki ayrıkuyuya 1’er damla (50 µl) damlatınız.
2. Kontrol örneklerini (M46a) Test Latex Reagent (kit içerisindemevcut) ve (M46b) Control Latex Reagent (kitiçerisinde mevcut) ile aşağıda belirtildiği gibi ( bk.nız TestProsedürü) test ediniz.
3. Eğer aşağıdaki durumlardan birigözlenirse reaktiflerin bozulduğundan şüphelenilir.
a. Test Latex Reagent (M46a) ile Positive Control (M46c) arasında reaksiyon gerçekleşmez ise veyareaksiyon zamanla zayıflar ise.
b. ControlLatex Reagent (M46b) ile Positive Control (M46c) arasındareaksiyon gerçekleşir ise
c. Reaktiflerrenk değiştirişe veya karıştırıldığı halde çözünmüyor, topaklanma yapıyor ise.
TESTPROSEDÜRÜ
1. Tüm reaktifleri oda sıcaklığınagetiriniz. Latex reaktifleri homojen bir süspansiyon oluncaya kadarkarıştırınız.
2. Sample Diluent’dan (M46d) (kit içerisinde mevcut) aglütinasyon slide üzerinde iki ayrı kuyuya50’şer µl damlatınız.
3. Steril öze ile Legionella morfolojisinde birkaç koloniseçilerek Sample Diluent ile emülsiyonyapınız.
4. Slide üzerindeki bakteriyalsüspansiyonlardan birine Control Latex Reagent’den (M46b)1 damla(50 µl), bir diğer süspansiyona Test Latex Reagent’dan (M46a)1 damla(50 µl) damlatınız. Damlalığı slide üzerine değdirmeyiniz.
5. Karıştırmaçubuğu ile reaktifleri ( Control LatexReagent’dan başlayarak ) süspansiyon içerisinde karıştırıp, kuyu içerisine yayınız.
6. Slide’ı hafifçe sallayıp, 2 dakikabekletiniz. 2 dakika sonunda aglütinasyon sonuçlarını gözleyiniz.
7. Okuma sonrasında kullanılan tümlatex slidelar ve karıştırma çubuklarını atınız.
YORUM
|
Test Latex Reagent (M46a) Reaksiyonu |
Control Latex Reagent (M46b) Reaksiyonu |
YORUM |
|
+ |
- |
Campylobacter pozitif |
|
- |
- |
Campylobacter negatif |
|
+ |
+ |
Spesifik olmayan aglütinasyon |