Microgen Path- Chek Hygiene Protein

PATH-CHECK^TMHYGIENE PATHOGEN

PATOJEN TESPİTSİSTEMLERİ

Kontak petri ve swabların kullanıldığı yüzeyden örnek almateknikleri için metodların ve test prosedürünün temel unsurları ISO18593:2004(E)-Gıda ve Yem mikrobiyolojisi-standardında belirtilmiştir.

Bu standardın dikkate alınması gereken temel unsurları şunlardır:
 

1. Tüm örnek yüzeyleri için nemli swab kullanılmalı
2. Swabı nemlediren solüsyon herhangi bir deterjanıveya hijyen ajanını nötralize etmeli
3. Swab nemlendirici solüsyon örnek içeriğini;örneğin bakteriyal yükü korumalı ve toplanan örneğin değerlendirilme aşamasınakadar sabit olmasını sağlamalı.
4. Örnek alınan alan 100 cm2’den büyük olmalı
5. Spesifik patojenlerin analizi için swablar uygunzenginleştirici ortama transfer edilir.
6. Zenginleştirme sonrasında hedef organizmanıngözlenmesi için örnek uygun katı besiyerine transfer edilir.
7. Hedef mikroorganizmanın var- yok testi yapılır.
8. Kontak petri metodu (Dipslide, RODAC petriler ve3M PetrifilmTM  ) patojenikmikroorganizmaların spesifik tespiti için kullanılmamalıdır.

PROSEDÜR

ADIM 1:

Önceden nemli Path-Check Hijyen swabın kapağına dikkatliceaçınız.

 

ADIM 2:

Standart örnek yüzeyinden (10 X 10 cm) swap döndürülerek yüzeydenörnekler toplayınız. Örnek toplama yüzeyi düzensiz ise standart örneklemeprosedürü oluşturulup sürekli aynı prosedür uygulanmalı.

 

ADIM 3:

Test yüzeyinden swab örneği alındıktan sonra Path-CheckHygiene Broth tüpünün kapağı aseptik koşullarda açılarak swab tüpün içerisine dikkatliceyerleştiriniz.

Swap hemen Path-Check Hygiene Broth içerisine yerleştirilmezise taşıyıcı tüpe aktarılarak serin bir yerde tutunuz.

Path-Check Hygiene Broth tüpünü veya taşıyıcı tüpünü etiketleyiniz.

 

 

Notlar:

1. Swab Path-Check Hygiene Broth tüpüne swab ucu tüpün kenarına gelecek şekilde  45°’lik açı ile yerleştiriniz. Swabbacağını aşağıya doğru bastırınız. Swab bacağı kırılma noktasından ( swabucundan 45mm ) kırılacaktır.

2. Eğer swap hemen Path-Check Hygiene Broth içerisineyerleştirilmez ise, swab taşıyıcı tüpe aktarılarak serin bir yerde tutulmalı.Swab maximum sıcaklıkta 20 °C’de ancak 24 saat bekletilebilir.

ADIM 4:

İnoküle edilmiş örnek tüplerini uygun bir rack üzerineyerleştiriniz ve Koliform ve Salmonella için

35-37 °C’de 18-24 saat, Listeria için 28-30 °C’de24-48 saat inkübe ediniz.

Not: Listeria örneklerinin inkübasyonu 35-37 °C’degerçekleştirilirse yanlış pozitif riski artabilmektedir.

 

ADIM 5:

Renk değişimleri gözleyip sonuçları kaydediniz. Pozitifsonuçlar 18 saatlik inkübasyon sonrasında gözlenebilir, fakat negatif sonuçiçin inkübasyon sürelerinin tamamlanmasını bekleyiniz (Koliform ve Salmonellaiçin 24 saat, Listeria için 48 saat).

 

 

ADIM 6:

Yorum

Sistem	Pozitif	Negatif
Koliform	Sarı	Mor
Salmonella	Siyah	Sarı/Mor
Listeria	Siyah	Saman rengi

Tablo 1:  Path-CheckHygiene  Broth örneklerinin sonuç  yorumu

 

 

ADIM 7:

OPSİYONEL DOĞRULAMA PROSEDÜRÜ

Olası pozitif testler organizmanın varlığını doğrulamak içinuygun seçici agar petriye büyüme medyumundan bir damla ekim yapılır.

Aşağıdaki agar medyumların kullanımı BAM ve USDA/FSIS gibistandart test metodlarına uygunluk sağlar.

Sistem	Medyum
Koliform/ E.coli	mENDO VRBA
Salmonella	XLD Bismuth  Sulfide
Listeria	Oxford Palcam ALOA

Tablo 2: Pozitif olarak tespit edilen örneklerin doğrulamasıiçin uygun medyumlar

Petri örnekleri 35-37 °C’de 24-48 saat inkübeedildikten sonra petride hedef koloni gözlemi yapılır.

Şüpheli koloniler için ileri identifikasyon testleri  ( mikroskobik testler ve Microgen GNA ID(MID-64), GNB ID (MID-65)  ve Listeria ID(MID-67) gibi biyokimyasal testler ) uygulanmalıdır.